单位文秘网 2021-10-03 08:16:47 点击: 次
法制成供试品溶液,并在上述色谱条件下进样10 μL,测定补骨脂素峰面积,计算含量。结果供试品中补骨脂素含量的RSD值为1.02%,表明实验方法的重复性较好(见表3)。
2.8 回收率实验
分别精密称取9份已知含量的益智健脑胶囊(批号:150601)细粉约1.0 g,分别置于50 mL具塞锥形瓶中。精密称取补骨脂素对照品15.46 mg置50 mL量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀。每个具塞锥形瓶分别准确加入对照品5 mL和甲醇45 mL,按“供试品溶液的制备”项下方法制成供试品液,在上述色谱条件下进样10 μL测定,结果平均回收率为98.97%,RSD=0.61%(见表4)。
2.9 干扰试验
取缺五指毛桃的阴性样品,按“供试品溶液的制备”项下的方法制成阴性样品溶液,在上述色谱条件下进样10 μL测定。试验结果表明,本品辅料在补骨脂素出峰时间无吸收,证明辅料对补骨脂素的测定无干扰,从而可保证本品测定方法的准确性。
2.10 样品测定
精密吸取供试品溶液10 μL分别注入液相色谱仪,在上述色谱条件下测定,每样平行测定5份,计算样品中补骨脂素的含量,结果10批样品的补骨脂素含量为1.483 1~1.534 6 mg/g(见表5)。
3 讨论
(1)供试品溶液制备的选择采用甲醇直接超声提取并稀释样品后进样,样品色谱峰中,在补骨脂素出峰时间的2倍以后未出现杂质峰,方法简便,分离效果理想。
(2)波长的选择。取补骨脂素对照品溶液,在200~400 nm范围内扫描,结果在波长250 nm处有最大吸收,故检测波长确定为250 nm。
(3)流动相选择。根据文献资料及自拟,选择了4个不同组成的流动相进行筛选试验,结果流动相[乙腈-水(40∶60)]峰形良好,被测成分分离度大于1.5,理论塔板数大于4 000。
(4)柱温、流速改变的影响。取对照品溶液进样,考察初始柱温在20℃、25℃、30℃,流速在0.8 mL/min、1.0 mL/min、1.2 mL/min条件下,被测成分的分离度,结果柱温在25℃、流速为1.0 mL/min时分离度良好,能够保证补骨脂素检测的准确性。
(5)不同牌子或型号柱子的影响。采用3个不同厂家(“菲罗门”“安捷伦”“伊力特”)不同型号的柱子按相同色谱条件进样,结果被测成分分离度均良好,证明不同牌子或型号的柱子对本品检测影响不大。
(6)流动相比例的影响。对本品检测流动相[乙腈-水(40∶60)]的比例进行微调,进样检测,结果被测成分分离度均良好,证明本品检测使用的流动相较为适宜。
(7)破坏性试验的影响。采用强酸、强碱、高热、高湿、强光、氧化等方法对本品供試品液进行人为破坏,并进样检测,结果被测成分峰形良好,保留时间、分离度、板数均符合要求,证明本品检测方法准属性较强。
(8)重现性试验。在不同实验室,由不同分析人员分别对同一批样品进行检测,结果RSD值为1.02%,误差在规定范围内,证明本检测方法重现性良好。
4 小结
本文建立的高效液相色谱法,结果较为准确,且简便、快速、专属性强、可靠。
参 考 文 献
[1]现代中药学大辞典编委会.现代中药学大辞典[M].北京:人民卫生出版社,2001:371.
[2]董青松,欧彪,陈乾平,等.五指毛桃研究进展[J].广西医药,2006,28(6):950-952.
[3]赵丽萍,狄文武,冯锋,等.五指毛桃的化学成分[J].药学与临床研究,2008,16(1):5-7.
[责任编辑:陈泽琦]
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