单位文秘网 2021-07-09 08:08:41 点击: 次
摘要[目的]通过对河南温县3种不同种类山药蛋白质总量的测定及氨基酸成分的测定来比较这3种山药的营养价值。[方法]以3种不同种类的山药为样品,用凯氏定氮法测定3种山药的蛋白质含量,然后用高效液相色谱法对3种山药的氨基酸成分进行分析。[结果]温县番田山药蛋白质含量3.95%,普通山药(购自温县农贸市场)蛋白质含量2.82%,温县归真堂山药蛋白质含量3.97%;温县番田山药必需氨基酸含量0.389 9%,普通山药必需氨基酸含量0.288 0%,归真堂山药必需氨基酸含量0.625 7%。[结论]归真堂山药营养价值高于番田山药和普通山药。
关键词 山药;蛋白质含量;氨基酸;营养价值
中图分类号S632.1文献标识码A文章编号0517-6611(2014)30-10673-03
作者简介王蕾(1963- ),女,河南郑州人,副教授,从事生物化学与分子生物学研究。
山药(Dioscorea opposita Thunb.)为薯蓣科(Dioscoreaceae)薯蓣属(Dioscorea)植物的块茎,主要分布于热带和亚热带地区,全世界有600种以上,而我国有90多种[1]。山药又称薯药、玉芋等,据不完全统计,山药的各种名称有350种左右[2]。山药是我国传统的药食同源食物之一,我国自夏、商起就开始种植山药,明清以来逐渐应用为药材。山药在《神农本草经》中被列为上品,其性平、味甘,中医药学上用作益气、健脾胃、补肺肾药,主治脾胃虚弱、泄泻、消渴、遗精等症[3]。李时珍在《本草纲目》中将其功用概括为“益肾气,健脾胃,止泄痢,化痰涎,润皮毛”5个主要方面。现代医学研究表明,山药能治疗虚弱、消化不良、慢性肠炎、糖尿病、遗精、盗汗等症[4]。山药产量很高,营养成分全面,含有丰富的碳水化合物和蛋白质,其干品和谷物相比也毫不逊色,山药块茎主要含淀粉、蛋白质、游离氨基酸等营养成分,以及黏性多糖(包括黏液质及糖蛋白)、尿囊素、淀粉酶、胆碱、胆甾醇、麦角甾醇、多酚氧化酶等多种活性成分,这些化学成分是山药营养价值和活性作用的物质基础[5]。
河南温县为我国山药的道地产区,但温县种植山药的地方较多,不同地方山药品质也有很大差异。笔者通过测定河南温县3种不同山药的蛋白质含量和氨基酸成分研究山药的食用价值,为河南不同产地山药的开发和利用提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1样品。番田山药购自河南温县番田,普通山药购自温县农贸市场,归真堂山药购自温县归真堂。
1.1.2主要仪器。石墨消解仪,凯氏自动定氮仪,电子天平,2695型四元梯度高效液相色谱仪(美国沃特斯公司),检测器(2996型二极管阵列检测器)。
1.1.3主要试剂。硫酸铜(分析纯)、硫酸钾(分析纯)、氢氧化钠(化学纯)、硼酸(分析纯)、37%盐酸、95%乙醇、0.1%溴甲酚绿溶液、0.1%甲基红溶液,Waters公司试剂包:包括天门冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Va1)、蛋氨酸(Met)、赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、苯丙氨酸(Phe)17种浓度为2.5 mmol/L氨基酸混合标准溶液,6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生剂,硼酸稀释液,醋酸钠缓冲液浓A液;乙腈(色谱纯),盐酸(GR),超纯水(18MQ),其余试剂均为市售分析纯。
1.2方法
1.2.1山药蛋白质含量测定。采用凯氏定氮法测定总氮含量,再乘以6.25。
1.2.2山药氨基酸成分的测定。取0.50 g样品到水解管,加10 ml 6 mol/L的盐酸到水解管中后,使用酒精喷灯封口,110 ℃水解24 h,冷却后用6 mol/L的NaOH溶液调pH至90左右后移至50 ml容量瓶中。用超纯水洗涤3次,定容,过滤后取滤液进行柱前衍生后使用反相高效液相色谱法分析氨基酸含量。
柱前衍生:精确量取上述水解液0.4 ml,置于离心管中,加入稀释后的衍生剂A液0.2 ml,衍生剂B液0.2 ml后摇匀,在50 ℃水浴锅中加热45 min取出,待温度降至室温后加入正己烷0.4 ml摇匀,并用孔径为0.45 μm有机膜过滤,放置30 min后,取澄清的下层液进行高效液相色谱分析。
色谱条件:色谱柱为Ultimate Amino acid,5 μm,4.6×250 mm;流动相A为0.1 mol/L醋酸钠溶液∶乙腈=93∶7(体积比),流动相B为水∶乙腈=20∶80(体积比),其中醋酸钠溶液用冰醋酸调节pH 6.5,流动相梯度洗脱程序见表1;柱温37 ℃;流速1 ml/min;检测波长254 nm;进样量5 μl,记录山药的氨基酸色谱图,同时用外标法计算3种山药的氨基酸含量。
2结果与分析
2.1蛋白质含量的测定由表2可知,温县归真堂山药的蛋白质含量高于番田山药和普通山药,归真堂山药的蛋白质含量比番田山药高0.5%,比普通山药高40.8%;番田山药蛋白质含量比普通山药高40.7%。
2.2氨基酸成分的测定如图1、2、3、4及表3所示,3种山药氨基酸组成较为全面,含有17种氨基酸,且除色氨酸外,3种山药均含有人体必需的7种氨基酸,番田山药和归真堂山药精氨酸含量最高,普通山药的丝氨酸含量最高,归真堂山药的必需氨基酸含量高于番田山药和普通山药。
参考文献
[1] 宋永刚,胡晓波,王震宙.山药的活性成分研究概况[J].江西食品工业,2007(4):45-48.
[2] 蔡金辉,严渐子,黄晓辉,等.山药品种资源的分类研究[J].江西农业大学学报,1999,21(1):53-57.
[3] 姜芳婷,李明静,史会齐,等.山药的研究[J].河南大学学报:医学版,2004,23(2):4-6.
[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010版(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:27.
[5] 倪少云,宋学华.山药的营养成分分析[J].江苏药学与临床研究,2002,10(2):26-27.
[6] 张重义.不同山药品种的品质评价与分析[J].河南农业大学学报,1997,31(S1):42.
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