单位文秘网 2021-08-11 08:11:28 点击: 次
【摘 要】目的:了解泰州市区从业人员携带沙门菌菌型分布和药物敏感情况,为制定有效防治措施及指导合理用药提供科学依据。方法:对我中心2009-2010年度饮服从业人员健康体检中初筛分离到的148株疑似沙门菌株进行系统生化和血清分型鉴定并采用纸片扩散法( K- B)检测抗生素耐药性, 依据NCCLS规定判断结果。结果:2009-2010年度检出的沙门菌中 ,E群占62.96% ,D群占12.96% , B群占10.18%、 C群占8.33%,A群和其他群各占2.78%,其中中以E群的山夫登堡和火鸡沙门菌为优势菌型,分别为29.63%、25.00%。108株沙门菌药敏实验表明沙门菌对头孢噻肟、环丙沙星、复方新诺明高度敏感,但有耐药株出现;诺氟沙星、氨苄青霉素、庆大霉素、四环素、萘啶酸出现不同程度耐药,其中萘啶酸耐药率达100.00%,结论:泰州市区从业人员携带沙门菌血清型以山夫登堡和火鸡沙门菌为主,耐药分析提示应加强沙门菌耐药性监测,对合理选择及使用抗生素提供指导。
【关键词】沙门菌;菌型分布;耐药性;血清学鉴定
沙门氏菌在自然界中有2000多种血清型[1],在我国检出的沙门菌血清型约有200多种[2],几乎所有的血清型都会污染食物引起发病, 是人畜共患的肠道病原菌。饮食和服务行业的从业人员带菌往往会引起食物中毒和肠道传染病的发生或流行。为了解泰州市饮食、公共场所服务的从业人员肠道沙门氏菌带菌和药物敏感状况,进一步加强饮食、公共场所服务
行业的卫生监督管理及合理的用药指导。本文对泰圳市2009-2010年度从业人员健康体检初步分离出的148株疑似沙门菌进行系统生化和血清学鉴定,并对沙门菌株进行耐药性试验分析,现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 菌株来源 菌株系泰州市疾病预防控制中心2009-1010年对38018名从业人员健康体检的肛拭标本按国标经初步培养分离获得的148份疑似菌株(2009年80株,2010年68株)。菌株收集于MicobankTM冻存管中置-75℃冰箱保存。
1.2 主要试剂与仪器 营养肉汤、SS 培养基、MIU、 三糖铁培养基(北京陆桥生物技术有限责任公司)、MH琼脂和10种药敏纸片(氨苄西林、阿莫西林 /克拉维酸、头孢噻吩、环丙沙星、萘啶酸、诺氟沙星、头孢噻肟、 庆大霉素、 复方新诺明、四环素由江苏省疾病预防控制中心提供(由北京天坛药物生物技术开发公司生产),细菌鉴定仪由法国梅里埃生物制品有限公司生产,沙门菌诊断血清系卫生部兰州生物制品研究所生产。均在有效期内使用。
1.3 菌株复活、系统生化和血清学鉴定 将含收集菌株的MicobankTM迅速置于38℃恒温培养箱中融化15分钟,用无菌接种环挑2-3粒吸附菌株的磁珠放入营养肉汤增菌液中37℃ 培养 18 h后,划线转种SS琼脂平板 , 37℃培养 24 h后 ,挑取可疑菌落进行革兰染色镜检 ,将革兰阴性杆菌及初步生化符合沙门菌特点的单个菌落纯培养物进一步经ATB自动生化系统鉴定 ,再将系统生化鉴定结果属于沙门菌属的单个菌株进行血清学鉴定和分型。
1.4 药敏试验 试验方法和判断标准均按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS ) 标准,采用K-B 纸片扩散法,用大肠埃希菌ATCC25922 作为标准菌株[3] 。
2结果
2.1菌株鉴定结果 148份疑似菌株经系统生化和血清学鉴定,检出沙门菌株108株。其中2009年75株沙门菌,5株弗劳地枸橼酸杆菌;2010年33株沙门菌,25株弗劳地枸橼酸杆菌,5株奇异变形杆菌,5株系统生化提示沙门菌属,但A-F-O多价不凝。
2.2带菌状况分析 从38018份标本中,检出肠道沙门菌带菌者108例,平均检出率0.28%,其中2009年从业人员18650人,检出沙门菌75株 ,检出率为0.4%;2010年从业人员19368人,检出沙门菌33株,检出率0.17%,较上年度检出率降低,经卡方检验两者具有显著性差异 ( χ2= 18.02,P<0.05)。导致沙门菌检出率降低可能与以下因素有关:由于生活条件的改善导致个人防护意识增强,卫生习惯的改变;卫生监管部门的管理力度加强等。在108例带菌者中,男性36人,女性72人,可能与该行业中女性占大多数有关。
2.3沙门菌群型分布 根据ATB系统生化反应,血清学凝集,将108株沙门菌分为6个群(E群分E1,E4亚群),21个血清型。E群所占比例最高,68株占62.96%,D群居第2位,占12.96%,其次是B群占10.18%、C群8.33%、A群和其他群分别占2.78%。(表1)
3讨论
本实验结果显示,在疑似沙门菌株中除沙门菌外还检出30株弗劳地枸橼酸杆菌、5株奇异变形杆菌,其原因:同属肠杆菌科其抗原有部分相同,甚至少数种完全相同,其中弗劳地枸橼酸杆菌与沙门菌间抗原关系可能更密切些,因此细菌与诊断血清间交叉凝集反应现象甚为普遍。相关报道也甚为不少[4-6]。这提示我们应对这两种条件致病菌加以关注,因为他们也会引起食源性感染的发生。另外,有6株未鉴定出血清型,推测原因是可能受到血清分型试剂的限制,或与菌种冻存造成部分抗原缺失有关,或者是非A-F群沙门菌(有待进一步分析研究),由于沙门菌血清型种类繁多,新的血清型又不断出现,单纯的血清分型已不能满足需要,迫切需要新分型标准和检验方法来研究沙门菌的生物学特性。
本研究发现泰州市区饮服从业人员沙门菌平均检出率为0.28%,与有关报道基本相符[7]。同时,从业人员携带的沙门菌主要菌型是E群中的山夫登堡、火鸡沙门菌,分别占29.63%(26/108)和25.00%(27/108)以及D群中的都伯林沙门菌。该结果与我市2011年度哨点医院主动监测分离到的沙门菌主要血清型大体相符[8],但与其他地方还存在地区差异[9-10]。随着服务业的迅速发展,地区间物资交流频繁,外来人口的增多,特别饮服从业人员的流动性很强导致沙门氏菌在该人群的分布有很大的不确定性,一旦外来少见菌型的进入,容易引起广泛的感染,导致严重的公共卫生事件[11]。因此卫生部门必须加强食品和饮水环境卫生管理,特别是饮服从业人员的健康管理,要连续长期监测及时发现和治疗带菌者,才能最大限度地防止从业人员带菌污染食品,而造成疾病的流行与传播。
本文药敏结果显示,108株沙门菌对头孢噻肟、复方新诺明、阿莫西林/棒酸的耐药率为0,对环丙沙星耐药率仅仅为7.41%,提示本地可用这几种药物有效治疗沙门菌感染。而头孢噻吩、诺氟沙星、氨苄青霉素、庆大霉素、四环素、萘啶酸出现不同程度耐药,其中萘啶酸完全耐药达100.00%,这情形与吴伟元等人[12]的研究结果相似,但与王晓泉等人的研究稍有差异[13],主要是出现对诺氟沙星耐药菌株,应引起重视。因为氟喹诺酮类和第三代头孢类药物是目前临床治疗沙门菌感染的一线药物[14,15]。本实验中阿莫西林/棒酸的中介率最高达21.30%,表明在我市其存在向耐药发展趋势。目前沙门菌耐药现象日趋严重,大多与抗生素的广泛应用或使用不当有关,尤其多重耐药菌株的产生,可能是由于耐药质粒传递的结果,故定期对本地常见常见肠道感染的沙门菌的类型分析和药物敏感性检测,对指导临床合理正确使用抗菌药物,有效控制沙门菌引起的急性腹泻及减少耐药株的出现意义极为重大。
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