单位文秘网 2021-07-08 08:27:49 点击: 次
法制备不同浓度的细胞内、外液样品,按定量限和检测限的要求分别进行测定。结果显示:细胞内、外液阿司匹林的定量限均为20 μg/mL,细胞内、外液检测限分别为10、1.25 μg/mL。
2.5.7 含量测定
将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞分别种于培养皿中(5×105/皿),分为空白对照组和加药实验组(包括高、中、低3个亚组),其中,高、中、低组阿司匹林浓度分别为1080、720、486 μg/mL。培养36 h后,分别测定各组细胞内、外液中阿司匹林含量。测得人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞外液中样品浓度分别为562、350、148 μg/mL;人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞内液中样品浓度分别为425、354、304 μg/mL。
3 讨论
阿司匹林预防乳腺癌的途径可能涉及血小板、炎症、环氧合酶2(COX2)、激素或磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)[14-19],且其作用机制、副作用均与阿司匹林的用量有一定关系。因此,有必要探索简便、可行的测定阿司匹林动态药物浓度的方法,为安全有效使用阿司匹林提供依据。
本研究建立的紫外分光光度法考察了不同药物浓度作用相同时间后细胞内、外的阿司匹林含量变化。结果显示,阿司匹林能够进入乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞内液,随着阿司匹林处理浓度的增加,MDA-MB-231细胞内、外液中阿司匹林的含量均呈现增高的趋势,但是低剂量时细胞内、外液中阿司匹林的含量比最高。
2015版《中国药典》规定:阿司匹林含量测定使用酸碱中和滴定法,但其实际操作繁琐,需要分次研磨阿司匹林,终点不易辨认,误差较大。本法的测定对象涉及细胞内、外液,检测灵敏度要求更高。为提高细胞内液药物检测灵敏度,本研究采用反复冻融破碎细胞膜,加入三氯醋酸沉淀蛋白,不仅提高细胞外液药物检测灵敏度,而且缩短样品处理时间[20]。该法测定阿司匹林细胞内、外液含量简便、准确,可用于快速分析人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞内、外液的药物浓度。
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(收稿日期:2018-11-30 本文編辑:王 蕾)
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