单位文秘网 2021-07-08 08:09:28 点击: 次
摘要:该文报道了马兜铃酸A(AAA)的荧光光谱和荧光量子产率。在pH 2.5~9.6之间,AAA有较稳定的荧光,荧光较强。最大发射波长为 390 nm , 激发波长为323nm。以L-色氨酸为参比 , pH=6时测量了AAA在不同波长下的荧光量子产率 , 在最大激发波长 323 nm处的荧光量子产率为 0.00146。
关键词:荧光光谱;马兜铃酸;L-色氨酸;荧光量子产率
马兜铃酸A(Aristolochic acid A)的分子结构如图Scheme 1所示,它在生物、医学领域应用非常广泛。马兜铃(aristolochia contortaBunge)系马兜铃科马兜铃属植物,马兜铃酸A是马兜铃主要成分之一。马兜铃酸可用于支气管炎、鼻窦炎、扁桃体炎、肾盂肾炎、肾炎、前列腺炎等感染性疾病以及疖病、痤疮等,多与抗生素等配合使用以加速痊瘉。此外尚可用于肿瘤病人因化疗或放疗引起的白细胞数下降。刘家琴[1]等采用荧光光谱技术研究了马兜铃酸与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。徐立等[2]报道马兜铃酸是一种天然钙调素拮抗剂。但是 ,文献中均未报道 AAA自身荧光性质的研究内容。本文研究了AAA的荧光光谱 ,以L-色氨酸为参比, 测量了 AAA 的荧光量子产率。
1 实验
1.1仪器与试剂
F-4600荧光分光光度计;828型PH/ISE测试仪(Orion);UV-2501PC分光光度计(Shimadzu)。
马兜铃酸A(中国药品生物制品检定所,编号:110746-200406):以甲醇配成6.33€?0-5mol mL-1储备液,用时适当稀释;NaCl溶液(1 mol·L-1);NaOH溶液(1 mol·L-1);甲醇(色谱纯);纯净水。
1.2实验方法
在10 mL的容量瓶中,分别加入马兜铃酸A甲醇溶液、NaOH、HCl、NaCl水溶液,用纯净水定容,扫描溶液的荧光光谱。
为了计算荧光量子产率更加准确 , 在测量AAA荧光光谱之前 , 首先用罗丹明B 光量子计以及散射光板对 F-4600 荧光分光光度计的发射光谱和激发光谱进行校正。
2.结果与讨论
2.1AAA荧光量子产率的测量
荧光量子产率( Y)定义为荧光物质吸光后发射的荧光的光子数与所吸收的激发光的光子数之比值。 在实验上 , 一般用参比法测定某物质的荧光量子产率。 通过测量待测物质和参比物质的稀溶液在同一激发波长下的积分荧光强度和对该波长激发光的吸光度 , 然后按下面式子计算待测物质的荧光量子产率[3]
式中 , Yu、Fu、Au 分别表示待测物质的荧光量子产率、积分荧光强度和吸光度; Ys、 Fs 、As分别表示参比物质的荧光量子产率、积分荧光强度和吸光度。L-色氨酸由于化学性质稳定、 量子产率高且吸收光谱与发射光谱基本不重叠 , 因此经常被用来作为参比物。 本文用L-色氨酸为参比 , 测量 AAA的荧光量子产率。
配制适当浓度的 AAA水溶液和L-色氨酸溶液 , 使两者的吸光度相近且不大于 0.05, 扫描吸收光谱(见图 2)并读取一定波长的 A u 和 As 值。 再扫描 AAA 水溶液和L-色氨酸溶液在不同激发波长下的荧光光谱(分别见图3和图4) , 计算给定波长范围内的积分荧光强度 , 最后按式(1)计算AAA的荧光量子产率[4]。
由图3 和图4 可见 , 在不同激发波长下 , 马兜铃酸A和L-色氨酸的荧光发射强度不同 , 但发射光谱峰位置不变 , 两者的最强发射波长分别为 390 和 353 nm。
以L-色氨酸在激发波长280 nm的荧光量子产率0.14为标准,测得L-色氨酸和马兜铃酸A在不同激发波长下的荧光量子
参考文献
[1]刘家琴,田建袅,谢建平等.马兜铃酸与人血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究[J]光谱实验室,2006,23(01)
[2]徐立,黄树模.马兜铃酸与钙调素相互作用的荧光光谱分析——一种非钙离子依赖性钙调素拮抗剂的研究[J]中国生物化学与分子生物学报, 1992,V8(01): 86-92
[3]许金钩,王尊本.荧光分析法(第三版) .北京: 科学出版社,2006.11
[4]魏永巨,李娜,秦身钧. 磺基水杨酸的荧光光谱与荧光量子产率[J]光谱学与光谱分析,2004,24(6)647-651
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