单位文秘网 2021-08-19 09:11:38 点击: 次
组织的形成和内环境稳定发挥重要作用[4]。与中医学“正气存内,邪不可干”等理论一致,微生态学认为,正常情况下,肠道菌群与机体处于一种动态的平衡,而在某种因素的影响下正常菌群与机体的微生态平衡被破坏,而造成菌群失调时,机体的免疫功能和定植抗力下降,外界的致病菌趁虚而入在体内定植而导各种致疾病的发生[5]。随着研究的深入和相关检测技术的不断发展,肠道菌群失调在多种疾病发生发展过程中的作用也越来越受到重视。近年的研究表明,肠道菌群可影响机体的免疫功能[6-7],肠道菌群的失调与肥胖、糖尿病、心脑血管疾病、胃肠道肿瘤及类风湿关节炎、炎症性肠病等自身免疫性疾病等诸多疾病的发生发展密切相关[8-11]。
2 肠道菌群的检测方法
由于肠道微生物多为厌氧型,约80%的细菌不可培养,因此传统的微生物培养计数的方法已经不适用于肠道菌群的研究。目前比较常见的方法有变形梯度凝胶电泳(DGGE)技术、荧光原位杂交(FISH)技术、实时定量PCR(RT-PCR)技术、16S rDNA测序分析技术等。见表1。
3 针灸对肠道菌群的调控作用
3.1 针灸对胃肠道疾病肠道菌群的调节作用
当肠道内环境紊乱时,致病菌及其释放的内毒素增加会使肠黏膜生物学屏障受到损伤,致病菌及其抗原释放多种活性物质,易使患者出现腹泻、便秘和肠易激综合征等胃肠道疾病。Kassinen等[14]通过16SrRNA探针杂交发现肠易激综合征有明显的菌群改变,主要菌群为粪肠球菌、柯林氏菌和粪肠杆菌。Tana等[15]研究也证明肠易激综合征患者粪便中韦荣球菌的数量有明显的增加。Zhao等[16]的研究表明成人慢性便秘患者的粪便进行培养,发现相对于正常人,便秘患者粪便中双歧杆菌属和乳酸杆菌属数量均显著减少,而潜在致病菌数量增加。
针灸对肠道菌群具有一定的调控作用。侯天舒等[17]研究表明电针可以提高溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群的丰度值及多样性指数,可提高菌群中乳酸杆菌(Lactobacillus sp.)和毛螺科菌(Lachnospiraceae Bacterium)的含量,降低双梅梭菌(Clostridium bi Fermentans)的含量。韩晓霞等[18]研究表明电针可影响溃疡性结肠炎模型大鼠的多样性和丰度,增加Lactobacillus sp.、Lactobacillus johnsonii等肠道益生菌的含量,减少Clostridium Bifermentans等致病菌的含量,表明电针可以提高肠道益生菌的定植能力,降低致病菌(或疾病相关菌)的定植能力,进而发挥保护溃疡性结肠炎肠道微生态的作用。Wang等[19]研究表明与模型组对比,隔药饼灸组和柳氮磺胺吡啶组的有益菌如Bi dobacterium和Lactobacillus含量上升,而E.coli and B.fragilis等有害菌含量减少。Qi等研究结果显示,结肠炎大鼠模型中Proteobacteria为优势菌门,Saccharibacteria,Sphingomonas和Barnesiella为优势菌属,经过艾灸和美沙拉秦治疗后,2组大鼠中以上菌群含量降低,且恢复至与健康大鼠相似水平,因此艾灸对肠道微生物具有一定的调节作用[20]。王树东等研究表明,温和灸关元穴使双歧杆菌、乳酸杆菌数量有所增加,温和灸天枢穴使肠杆菌、肠球菌数量有所增加,因此,温和灸不同部位的募穴可以选择性调整肠道优势益生菌群[21]。
3.2 针灸对代谢性疾病肠道菌群的影响
肠道微生态参与机体代谢和能量平衡的调节,包括与糖类和脂质代谢相关的能量摄取、利用和消耗,在某些因素致肠道微生态失衡的情况下,对肥胖、糖尿病、代谢综合征等疾病具有潜在的致病作用。
关于肠道菌群引起肥胖的主要机制是肠道微生物通过接触机体局部细胞或组织直接发挥作用,或通过释放化学物质影响代谢的分子信号通路间接作用于远端器官,如短链脂肪酸、脂多糖、肠肽等作用于宿主远端器官而发挥作用[22-23],研究也证明,肠道菌群与宿主间的平衡被打破后,肠道微生物群将从
能量吸收、脂多糖、短链脂肪酸、胆碱、胆汁酸代谢以及微生物-肠-脑轴等多种途径影响机体的营养能量代谢过程[24-25]。Backhed等[26]研究发现肥胖相关的肠道菌群特征,厚壁菌门与拟杆菌门的比例升高,表明肥胖时会引起肠道菌群结构的改变。而Gordon研究小组通过分析相同饮食结构欧的遗传性肥胖小鼠和瘦型小鼠肠道末端微生物的16S rRNA基因序列,发现与瘦型小鼠比较,肥胖小鼠肠道中厚壁菌门细菌比例相对升高,而拟杆菌门细菌含量下降,当肥胖小鼠体质量降低时,其体内拟杆菌门又会恢复性增加,同时在分析人体肥胖者与非肥胖者的肠道微生物构成时,也发现了与动物模型一致的變化[27]。肠道菌群能不同程度地代谢蛋白质和内源性含氮化合物、通过调节胆汁酸的合成影响胆汁酸的肝肠循环过程,如果肠道菌群发生紊乱,使得结合胆汁酸转化为游离型胆汁酸的过程受阻,会造成体内游离胆汁酸水平下降,进而减弱游离胆汁酸对肠道细菌的抑制,加剧肠道菌群失调,从而严重影响体内糖、脂肪代谢,最终导致肥胖及糖尿病[28]。Cani等[29]证实T2DM小鼠存在肠道菌群失衡,肠黏膜通透性增加,补充益生菌能增加内源性GLP-2产生,改善肠黏膜屏障功能,并改善小鼠代谢紊乱。在中国、瑞典、丹麦的2型糖尿病患者肠道菌群分析中,发现肠道菌群的代谢产物包括一种特殊类型的短链脂肪酸,这种脂肪酸可从多种途径降低血糖水平[30]。通过移植“肠道菌群保护性细菌”,可预防或延缓2型糖尿病的发生[31]。
目前,应用针灸调控代谢性疾病肠道菌群的报道还不是很多。Xu等[32]研究表明腹针治疗单纯性肥胖患者后会出现乳酸杆菌和双歧杆菌增加,拟杆菌属和产气荚膜梭菌减少,电针后的肠道菌群的改变可能是针刺治疗单纯性肥胖的机制之一。周莉萍等研究表明,与健康组比较,肥胖患者肠道菌群需氧菌总数、厌氧菌总数、大肠杆菌、类杆菌均减少;肠球菌明显增加。针刺治疗后肥胖患者肠道菌群中需氧菌总数、厌氧菌总数、肠球菌均显著减少;类杆菌明显增加。针灸减肥过程中主要涉及对肠球菌和类杆菌数量的调节,该调节过程可能与针灸减肥相关[33]。
4 小结与展望
目前针灸对肠道菌群的影响研究还比较少,病种比较单一,主要集中在胃肠道疾病和代谢类疾病,并且针灸影响肠道菌群的种类比较单一,主要是几中常见的有益菌和致病菌。接下来还可以从以下几个方面进行深入研究:1)利用先进的现代科学技术来研究针灸对肠道菌群的影响:目前尤其是早期的一些文章主要采用微生物直接培养的方法进行肠道菌群的研究,方法比较单一。近年来,肠道菌群检测技术得到迅速发展,应合理应用各类现代技术进行肠道菌群的检测和研究,如16S rDNA测序、变形梯度凝胶电泳等,适用范围广、获得的信息丰富,适于肠道菌群多样性和复杂性的研究。2)肠道菌群功能的研究:目前对肠道菌群的检测多停留于常见菌群的含量变化研究,菌群多样性和含量的变化背后对组织和机体更深层的意义研究较少,这一方面值得进一步深入探讨。3)肠道菌群与代谢物相关性研究:肠道菌群与宿主代谢密切相关,但是特定菌群与具体的某个代谢物之间的具体关系我们仍然知之甚少,之后的研究可以对肠道菌群与代谢物的关系进行研究,主要是利用R语言编写相关程序,以皮尔森相关系数为原理,研究代谢物与菌群的相关性。4)抗生素干扰肠道菌群组的设立:目前国内肠道菌群动物实验设计大多数未设计抗生素组,抗生素组的设立主要是通过使用抗生素抑制部分肠道菌群,建立抑制肠道菌群的动物模型,与普通动物进行对比,观察其菌群及对代谢物等的影响,可根据不同实验目的,应用不同的抗生素建立肠道菌群失调动物模型。
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