单位文秘网 2021-08-11 08:12:38 点击: 次
【中图分类号】R155.5 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)01-0338-02
民以食为天,食品与人民群众的生活息息相关。近年来,食品安全事件频发,从而引起公众的不满情绪,食品安全问题越来越引起各方面的关注,也成为现阶段我国亟待解决的一大问题。为推测食品的安全性和卫生程度,我国把食品的微生物污染列为评价食品卫生质量指标。食品微生物检验成为保证食品安全重要防线,检验数据的准确可靠可以为疾病预防控制、卫生监督及采取相应措施提供科学依据。但是由于食品品种多,结构及成分复杂,给检验过程带来难度,虽有国家标准方法的规定,但实际工作中还存在许多复杂因素,忽视这些因素,很可能给检验结果带来偏差,本文对基层卫生单位影响食品微生物检验结果的因素进行了探讨,以期更好地开展食品微生物检验,保障消费者的食品安全。
1 微生物检验专业人员
检验人员的专业技术素质直接影响检验结果的可靠性,因此微生物检验人员应具有较强的专业知识和技能,从人员结构上看, 多年来以中等或大专毕业生为主体的检验队伍正逐步为本科毕业生所代替, 一些受过微生物专业训练的研究生人才也陆续培养出来。但是还有一些基层卫生单位从事微生物检验的专业人员人数少,任务重,人员年龄结构老化,需要加强。微生物检验专业人员必须在思想上提高对检验质量的重视, 以检验结果的真实性、准确性作为第一要务。认识到微生物检验数据是质量控制的核心内容, 其中各个检验环节均应按要求严格执行, 建立全面、全程的检验质量控制体系。因此, 除要有强烈的事业心、高度的责任感外, 从事微生物检验的技术人员, 还必须经过广泛的基础教育和训练, 包括微生物学、基础医学等知识的学习以及专业化的实验技能培训, 并经过考核合格后持证上岗[1]。安全是实验室重中之重。要把实验室的安全教育纳入日常工作,并坚持经常化、制度化。经常对实验人员及学生进行安全教育和安全技能训练,如各类灭火器、消防栓的正确使用;各类化学品发生危险时的处理方法;避免细菌污染的措施等,使安全工作深入人心并落到实处,通过安全检查消除事故隐患,确保实验室日常工作安全进行。
基层卫生单位要创造条件,让检验人员参加培训和技术交流,丰富专业知识,提高检验水平,及时了解和掌握微生物检验领域的新技术、新的进展,并运用到实际工作中。微生物检验从方法学上看, 基本上是以手工为主, 主观性强。在操作过程中每一个环节都可能出现变化, 因此, 操作人员的经验、态度、操作熟练程度尤为重要。在按国家标准方法和规范操作的同时, 不断探索更加先进的技术。在技术人员的管理上, 可采取培训与考核严密结合的方法, 以随时评估其检验能力和操作熟练程度, 必要时采取再培训。此外, 微生物检验领域的全面质量管理和实验室国内、国际标准化组织质量认证的概念正逐渐为检验界所理解和接受。基层卫生单位微生物实验室在做好室内质控的同时,还应尽可能参加市级、省级、国家级等实验室组织的的室间质评活动,尽力拓宽渠道,参与室间质评活动,以提高微生物检验人员的水平。
2 仪器设备
检测仪器设备是微生物检验质量的根本保证,微生物实验室应配备足够检验工作需要的仪器设备和器材,建立起一整套规范化的仪器设备管理的档案和操作程序,对每台仪器的有关原始资料和技术资料建档,并由专人负责保管,微生物实验室的主要仪器及设备包括:微生物自动鉴定仪、微生物快速初筛仪、菌落计数器、高压灭菌器、干热灭菌器、离心机、蒸馏设备、培养箱、厌氧箱、水浴箱、普通冰箱、低温冰箱、显微镜、超净工作台、酶标仪、PCR 仪、电泳仪、凝胶成像系统等。所有的仪器和设备均应按生产厂家提供的方法和有关规定正确使用。操作者必须严格遵守操作规程,做好记录,并做好运行检查及仪器维护。对于连续工作的仪器如冰箱、培养箱,每天都应进行温度监控和记录并定期维护,以保证仪器处于良好的工作状态。需要强制性定期检定的仪器和设备,应经计量鉴定部门检定合格后方可使用。仪器设备量具的量程,精确度等,要符合检测项目的相应要求。高压蒸汽灭菌器须按规定定期检测,发现隐患及时排除,到安全使用期后应及时报废。对相应的新技术,新方法所需要的检测设备要及时更新。但是还有一些基层卫生单位由于经费不足等原因,微生物检验的检测设备陈旧老化,数量不足,亟待解决。
3 培养基与试剂
培养基质量要求的高低直接关系到微生物培养的成败。购置新批号培养基和试剂时要求供应商提供产品质控证书等相关证件, 尽量选择通过ISO 9001的生产厂家购买。培养基和试剂使用前首先通过外观、批号、pH 值、灭菌要求、选择性等进行初步评估, 按照培养基和试剂标签说明的贮藏条件保存, 不同批号的培养基和试剂不要混合使用。应用已知标准菌株作质量鉴定,方可使用。培养基的配制要有记录可查, 要按要求选择合适的方法(如温度和时间等) 进行灭菌,还应有高压灭菌效果的监测记录。高压灭菌培养基应随机抽样5%~10%作无菌试验;无菌分装的培养基应在培养箱(36℃)过夜,无菌生长才能使用,培养基应放在适当温度下保存。同时, 应根据检验微生物指标不同, 选择不同的培养基, 如基础培养基、选择性培养基和生化反应培养基等。培养基应有明确标记与配制日期。液体培养基应清澈。含倒管者,倒管内应液体充盈,无气泡;固体培养基应保持适当的硬度,接种前无菌落;不定期抽样检查ph 值,要求在规定的ph±0.2 内。有指示剂的培养基要保持应出现的颜色;需在有效期内使用,使用时观察培养基是否变质。
生化反应试剂盒每个批号, 在正式用于出报告之前, 都要按说明书作一次专门测试以判别质量, 同一批号不同时间到货也需要同样测试。运送、储存条件不同, 可能会影响质量。自配的染液每周必做质控。自配的染色液要求将整个配制过程形成记录并保存。实验室常购买商品化的染色液。在购买时应核对品牌、试剂名称、批号、存放条件、失效期等; 初次使用必须用标准菌株作质量鉴定, 以证实其质量要求,如果有条件可参照国际食品微生物与食品卫生委员会( ICFMH ) 提供的关于培养基质控方法进行质控[2]。危险化学品及菌种由专人负责保管,并建立严格的使用登记制度。
培养基和试剂的贮存应按照其说明的贮存条件来保存,试剂贮存时注意避光、冷藏, 以保证试剂的稳定性[3,4] 。试剂的储存应遵守以下原则: 无机和有机试剂分别存放; 易燃、腐蚀性试剂应有明显颜色标识并存放在安全处; 有毒试剂须上锁; 腐蚀性试剂存放在视线以下。经常检查贮存在冰箱中的各种血清, 若发现浑浊、出现絮状, 立刻停止使用。放试剂的冰箱要及时清理,以保证足够的空间。
4 检验标准和方法
《食品卫生检验方法微生物学部分GB4789—2010》颁布之后,我国的食品卫生微生物检验逐步走上了标准化的发展轨道。除此之外,我国还颁布有各类国家标准、行业标准及卫生行政部门颁布的检验方法等。微生物检验应严格遵从这些标准和规范,确保检测数据准确可信[3-4]但是在实际工作中存在许多复杂因素影响食品微生物学检验,可能给检验结果带来偏差甚至错误,因此必须对影响检验结果的诸多因素采取控制手段保证检验结果的正确性。随着食品业对新技术的采用,食品中所含微生物的种类发生了变化,现用的检验标准和方法会对食品中微生物的某些种类造成漏检。例如现用标准和检验方法培养的菌落只是好气微生物或兼性好气微生物的菌落,但这并不是食品中杂菌的总数,厌氧微生物在这种培养条件下漏检;引起低温冷冻储存食品变质的主要是低温菌,所以对冷藏食品和冷冻食品的培养温度应降低,采用37℃的培养温度会导致相当数量的低温型微生物漏检;食品在制造、加工、贮运等过程中,受到加热、干燥、浓缩、冷藏或冷冻等理化处理,使细菌受到不同程度的损伤,损伤菌是活菌,但其后可以复原,在适当的条件下可以增殖,导致亚致死损伤菌漏检。虽然有些细菌在37℃或有氧的条件下不发育增殖,但在它们发育增殖的储存条件时已代谢出毒素,易引起食物中毒,种种漏检因素,都会致使食品微生物污染数量与检验结果之间发生较大差异。微生物检验要注重上述方面的质控,同时还应关心分析标本采集、运送、处理和分析后数据处理、结果报告、联系临床等多个方面影响因素。因此,从事具体检测工作时,应全面考虑,抓住重点,对食品卫生质量进行客观评价。
5 环境设施
微生物检验对检测场所的环境设施要求较高,各项设施和环境条件应既符合检测技术规范的要求, 又能保障工作人员的健康和环境的安全,但是有的基层卫生单位微生物实验室比较简陋,简单分为操作间和缓冲间,区域划分不明确,这样格局的实验室显然不适应医学发展的要求,会影响到检验结果的正确性。必须对实验室进行合理分区, 布置微生物实验室时要不能影响检测结果的可靠性、有效性和准确性,并按规范进行装饰, 例如净化实验室应采用封闭过滤除菌, 通风方式、吊顶、隔墙、围护全部采用彩钢板, 地面作环氧树脂自流平处理。微生物实验室要设立净化区、更衣区、非净化区,要配备生物安全柜,对无菌室、超净工作台、生物安全柜必须进行定期监测和日常维护, 并有监测和维护记录。日常维护包括紫外线灯擦拭、滤网擦洗更换、空气消毒及全面清洁卫生等。实验室的总体布局和各部位的安排要充分考虑减少潜在的对样本的污染和对人员的危害, 做好工作人员的隔离防护工作,实验中要强化无菌操作要领。微生物实验室的无菌工作区域是检测工作的基础,该区域应当有明确的标识,并对进出、使用进行有效地控制,同时要做好记录。定期对无菌工作区域进行监测,对废弃的样品和废弃物应当制定专门的程序加以文件化。
综上所述, 基层卫生单位微生物实验室虽然在各方面有了长足的进展,但是由于历史的原因,还有很多不足之处,建议在人口稀少和经济欠发达地区,基层卫生单位实现资源共享,将有限的资金和人力集中在一个微生物实验室,而不是分散到不同部门不同单位,建立一个基层卫生单位中心实验室,最大限度地完善中心实验室食品微生物检验的质量控制。这既是实验的要求,也是对消费者、对企业负责的表现。
参考文献:
[1] 卫生部办公厅. 全国疾病预防控制机构工作规范( 2001版) [ S]. 2001: 236-240.
[2] 陈剑刚. B /T 15481-2000标准在卫生检验质量控制中的应用. 中国卫生检验杂志, 2002, 12( 4) : 487.
[3] 娄峥,葛平.临床微生物检验的质量控制[J].检验医学,2004,19(2):157-159.
[4] Betty AF,Daniel FS,Alice SW, et al. Diagnostic microbiology[M].10th ed,St.Louis,Missouri,1998:51259,64277.
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